Рябов В.В., Суслова Т.Е., Марков В.А., Попонина Ю.С., Штатолкина М.А., Попов С.В., Карпов Р.С.
(ГУ НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН, Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск; 634034, Россия, город Томск Улица Киевская 111 а;
e-mail: rvvt@cardio.tsu.ru)
Введение: постинфарктное ремоделирование левого желудочка (ЛЖ), приводящее к прогрессирующей дилатации и нарушению его геометрии и функции, является морфологическим субстратом хронической сердечной недостаточности (ХСН). Разработка способов профилактики развития этого процесса сохраняет свою актуальность, поскольку существующие методы борьбы с этим явлением демонстрируют свою ограниченность. Кроме того, установлено, что существующие методы экстренной реваскуляризации миокарда (тромболизис, экстренная баллонная ангиопластика) исчерпали свой потенциал в отношении ограничения размера некроза миокарда. В последние годы изучаются возможности различных видов клеточной кардиомиопластики для профилактики постинфарктного ремоделирования ЛЖ.
Цель работы: изучить безопасность и эффективность трансплантации аутологичных мононуклеарных клеток костного мозга (МККМ) у больных острым ИМ.
Материал и методы: в открытое рандомизированное параллельное контролируемое исследование включено 60 больных с первичным трансмуральным острым ИМ. Диагноз острого ИМ устанавливали на основе критериев ВОЗ. Протокол исследования одобрен этическим комитетом ГУ НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН. По параметрам, определяющим ближайший и отдаленный прогноз заболевания, группы пациентов были сопоставимы.
Таблица 1.
У 12 пациентов (5 и 7 основной и контрольной группы соответственно) выполнена первичная баллонная ангиопластика и стентирование места окклюзии коронарной артерии. Остальным больным при поступлении выполняли системную тромболитическую терапию стрептокиназой 750000 ЕД. В этом случае о времени восстановления антеградного кровотока в ИСКА судили по косвенным критериям реперфузии миокарда. ККМП проводили во время коронароангиографии на 7-21-й день болезни. За 4-6 ч до процедуры ККМП для получения 100 миллионов аутологичных МККМ пунктировали крыло подвздошной кости, забирали 100 мл аспирата костного мозга в два 60-миллилитровых шприца. Затем методом градиентного центрифугирования (градиент плотности “HISTOPAQUE-1077”) выделяли МККМ. Подсчитывали жизнеспособность клеток после окраски витальным красителем - трипановым синим, которая составляла 98 - 99%. Методом проточной цитофлоуметрии выполняли фенотипирование трансплантируемых клеток. Среди полученных мононуклеарных клеток содержалось до 5,4 млн CD 34+ - гемопоэтических стволовых клеток костного мозга, и до 1 млн CD 34+CD 38- - клеток костного мозга. Доставку аутологичных мононуклеарных клеток костного мозга выполняли с помощью их внутрикоронарного введения после эффективной баллонной ангиопластики и стентирования инфарктсвязанной коронарной артерии. После этого готовили суспензию МККМ 2-4х106 в 1 мл гепаринизированного раствора (20 Ед гепарина в 1 мл), которую вводили в стентированную артерию. Распределение МККМ изучали методом радионуклидной индикации клеточной взвеси 40-60 мКи 99mТс-HMPAO, “Ceretec”. Сцинтиграфическую индикацию распределения меченных МККМ проводили через 30 мин, 2,5 ч и 24 ч после их введения. Исходно, через 3 и 6 месяцев после острого ИМ оценивали клиническое состояние, течение болезни, проводили тест 6-минутной ходьбы, оценивали качество жизни с помощью Миннесотского вопросника качества жизни у больных с ХСН. Эхокардиографию выполняли исходно, через 3 и 6 месяцев после острого ИМ. Суточное мониторирование ЭКГ, нагрузочная однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОЭКТ) с 199Tl и аденозином выполнялись через 2 недели и 6 месяцев после ОИМ. Иммуноферментным методом определяли содержание в сыворотке крови инсулиноподобного фактора роста 1 (ИПФР-1) и основного фактора роста фибробластов (ФРФ) до трансплантации клеток, на 1-е, 5-е и 12-е сутки после трансплантации клеток.
Результаты: все больные прошли 6-месячный период наблюдения. Процедуры, связанные с протоколом исследования, переносились хорошо, не зарегистрировано осложнений, как во время забора аспирата костного мозга, так и во время и после введения МККМ в ИСКА. При проведении анализа частоты летальных исходов, повторных ИМ, рестеноза ИСКА, микрососудистой ангиопатии, злокачественных аритмий, по функциональному классу ХСН, по качеству жизни, толерантности к физическим нагрузкам в течение 6 месяцев после острого ИМ достоверных различий между группами выявлено не было (табл. 2).
Жизнеспособность меченых радионуклидом МККМ составляла 96±4%. Внутрикоронарное введение взвеси клеток обеспечивало их фиксацию в миокарде больных: 7,8% (9,4х106) клеток через 30 минут, 6,8% (8,2 х. 106 клеток) через 2,5 ч и 3,2% (3,8 х. 106 клеток) через 24 ч после введения. Наибольшее количество меченых клеток после внутрикоронарного введения мигрировало в печень (29,3±4,2% через 30 минут после введения). С течением времени часть клеток перераспределялась в селезенку (14,1±2,1% через 2,5 ч после введения) (рис.1). В 90% случаев наблюдали повышенную аккумуляцию меченых МККМ вместе пункции подвздошной кости (7,2±1,2% через 24 ч после введения).
Рисунок 1. Распределение меченых МККМ в организме больного ОИМ.
У больных основной группы несколько раньше происходило улучшение локальной сократимости ЛЖ, чем в контрольной группе, - через 3 месяца после острого ИМ (1,4±0,34 против 1,7±0,34, соответственно, р<0,05), однако к 6 месяцу различие исчезало (1,4±0,35 против 1,6±0,4, соответственно, разница недостоверна).
У всех больных на 3-й неделе острого ИМ по данным ОЭКТ с 199Tl и аденозином были выявлены стабильные (30,0±14,0 в 1-ой и 28,5±9,0 во 2-ой группах, р=0,6) и преходящие (4,5±4,3 в 1-й и 3,9±3,7 во 2-й группах, р=0,9) дефекты перфузии миокарда. Через 6 месяцев в обеих группах уменьшалась величина стабильного дефекта перфузии миокарда (19,4±12,0 и 12,3±10,0 в 1-й и 2-й группах соответственно, р=0,4). У больных 2-й группы сохранялся преходящий дефект перфузии 8,7±6,0, чего не наблюдали в 1-й группе 0,6±0,2, р=0,02. Динамика преходящего дефекта перфузии в 1-ой и 2-ой группах составила 0,2±0,1 и 11,8±11,0% соответственно, р=0,01.
На 5 и 12 сутки после вмешательства было отмечено достоверное повышение содержания в плазме крови ИПФР-1 у больных 1-й группы. Была выявлена прямая корреляция между количеством введённых МККМ и содержанием основного ФРФ. (рис.2-3).
Рис.2 Динамика содержания ИПФР-1.
Рис.3. Взаимосвязь содержания основного ФРФ и количества аутологичных МККМ.
Выводы: ККМП является безопасным методом лечения, не вызывает дополнительного повреждения миокарда, не провоцирует появления злокачественных аритмий. Внутрикоронарное введение МККМ при ОИМ приводит к проникновению и фиксации клеток в миокарде. Трансплантация аутологичных МККМ увеличивает содержание ИПФР-1 и ФРФ. Внутрикоронарное введение МККМ больным острым ИМ не влияет на глобальную сократительную функцию ЛЖ по результатам 6-месячного наблюдения.
Таблица 2.
См. также:
Исследование условий пролиферации мезенхимальных стволовых и прогениторных клеток костного мозга в культуре
Новые подходы к регуляции экспрессии чужеродных генов в стволовых клетках
Клеточные технологии в терапии больных с неврологической патологией
Разработка систем искусственного жизнеобеспечения и заместительной клеточной терапии при заболеваниях печени
Дормантные стволовые клетки (ДСК) в эмбриогенезе и канцерогенезе
Особенности взаимодействия опаловых матриц на основе кубических упаковок наносфер SiO2 с клеточными структурами
Регуляция развития стволовых клеток поликлональными антителами
Репрограммирование посредством эмбриональных стволовых гибридных клеток
Клеточные технологии в коррекции возрастных изменений кожи лица, лечении ран и трофических язв. Результаты клинических исследований
Сравнение цитофенотипических профилей клеток мезенхимального ряда, изолированных из различных тканей человека
...
Обсудить на форуме
