Зинькова Н. Н.1, Е. Г. Гилерович2, И. Б. Соколова1, С. К. Вийде1, Е. В. Шведова1, Г. В. Александров1, П. В. Кругляков1, А. А. Билибина1, Д. Г. Полынцев1
(1 - ООО «Транс-Технологии», Санкт-Петербург, Россия; e-mail: natalia_z@alkorbio.ru; 2 - ГУ Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург, Россия)
Возможность применения мезенхимных стволовых клеток (МСК) при терапии экспериментального инсульта на сегодняшний день может считаться доказанной. Однако один из важных практических вопросов применения МСК при инсульте связан с выбором времени трансплантации клеточного материала.
Развитие ишемического инсульта сопровождается нарушением гематоэнцефалического барьера (ГЭБ). По литературным данным известно, что максимальная проницаемость ГЭБ у экспериментальных животных регистрируется через 2 - 4 часа после окклюзии средней мозговой артерии (СМАо). Через 5 часов проницаемость ГЭБ начинает снижаться и через 2 суток практически достигает первоначального уровня. К настоящему моменту практически ничего не известно о миграции МСК в ЦНС, в том числе и о возможности этих клеток преодолевать ГЭБ и/или гематоликворный барьер.
Эксперименты проведены на крысах инбредной линии Вистар - Киото. МСК выделены из костного мозга животных, культивированы и окрашены флуоресцентным красителем PKH26 in vitro. Ишемический инсульт смоделирован посредством СМАо. Внутривенную трансплантацию МСК проводили в день операции (группа 1) и через 3 суток после операции (группа 2). Животным из группы негативного контроля внутривенно вводили среду культивирования. Забор материала проводили через 1, 2, 4 и 6 недель. Изучали распределение флуоресцентно меченых клеток. Оценивали морфологические особенности развития инсульта.
Через 6 недель после операции флуоресцентно меченые клетки были выявлены в мозге обеих опытных групп (1 и 2). При введении МСК в день операции (группа 1) клетки располагались вокруг сосудов в обоих полушариях мозга. Визуально большее количество меченых клеток наблюдали в поврежденном полушарии. У опытной группы 2 меченые клетки располагались вблизи от эпендимной выстилки третьего и боковых желудочков. Через неделю после СМАо в группе негативного контроля наблюдали разрушение тканей мозга, инфильтрацию поврежденного участка воспалительными клетками. У животных из опытных групп на этом сроке уже идут процессы очищения от погибшей ткани. Через 2 недели после СМАо в группе 1 начинает формироваться образованная клетками глии граница между повреждением и пограничной с ним областью. На этом же сроке у животных группы 2 граница уже сформирована.
У контрольных животных еще наблюдаются процессы очищения от погибших тканей. Через 4 недели после экспериментального инсульта в контрольной группе завершается образование ликворно-глиальных кист. У животных обеих опытных групп кисты уже сформированы. На сроке 6 недель после СМАо во всех группах завершен процесс образования глиального рубца и кист. Площадь дефекта тканей была наибольшей в контрольной группе. Минимальная площадь дефекта наблюдалась в опытной группе 2. У животных из обеих групп клеточной терапии отмечена большая по сравнению с контролем пролиферация клеток в субвентрикулярной зоне и лучшая сохранность нейронов в области ишемической полутени.
Итак, клеточная терапия у инсультных животных дала положительный результат при трансплантации МСК как до, так и после закрытия ГЭБ. При этом мы получили разные картины распределения МСК по тканям головного мозга. Если трансплантация проведена в то время, когда нарушена целостность ГЭБ, то МСК выявляются вокруг сосудов в обоих полушариях; если после закрытия ГЭБ, то в мозге обнаружены единичные клетки в боковых желудочках. Мы предполагаем, что МСК секретируют определенные факторы, оказывающие нейропротекторное действие на клетки мозга. Возможность дифференцировки МСК в нейрональном направлении непосредственно в инсультной области мозга пока не доказана и подлежит дальнейшему изучению.
См. также:
Исследование влияния различных модификаций коллаген-хитозановых матриц на эффективность заживления ожогов у крыс как этап создания подложек для культивирования и направленной дифференцировки стволовых клеток
Апробация сочетанного применения аутологичных мезенхимных стволовых клеток и остеотропного материала для лечения пародонтита
Результаты клинического применения гибридных имплантатов для коррекции осложнений диабета
Оптимизация условий культивирования стромы костного мозга человека, обогащенной стволовыми клетками и опыт ее клинического применения при боковом амиотрофическом склерозе
Терапия ишемического инсульта головного мозга у крыс с помощью мезенхимных стволовых клеток
Аутологичные фибробласты в косметологии
Влияние искусственных поверхностей на остеогенную дифференцировку пула мезенхимальных стромальных клеток костного мозга in situ
Аллогенные клеточные трансплантации пренатальных и постнатальных мультипотентных стромальных клеток в лечении хронической сердечной недостаточности у пациентов с дилатационной кардиомиопатией
Стволовые потенции перисинусоидальных клеток Ито
Биохимические и морфологические изменения в печени больных хроническим гепатитом после трансплантации аутологичных стволовых кроветворных клеток (1-я фаза клинических исследований)
...
Обсудить на форуме
