Е.М. Белоконь, Я.И. Черник, Л.А. Комиссарова.
Львовский государственный университет.
Максимальная продолжительность жизни дрозофилы (Drosophila melanogaster линии Oregon) в условиях нашей лаборатории составляет 62+3 дня. Признаки старости проявляются в повышении вероятности смерти и реализуются в резком снижении численности самок и самцов после 30 дней содержания в стандартных условиях. Исследовали алкогольдегидрогеназу (АДГ), малатдегидрогеназу (МДГ), лактатдвгидрогеназу (ЛДГ), амилазу, аспартат-аминотрансферазу (АсАТ) и аланинаминотрансферазу (АлАТ) у самок и самцов линии Oregon в возрасте 1, 6, 12, 18, 24 и 30 дней. Готовили 10% гомогенаты мух в триглициновом буфере, рН 8,6. Дегидрогеназы и амилазу подвергали электрофорезу в полиакриламидном геле. Для выявления дегидрогеназ электурофореграммы окрашивали нитро-синим тетразолием в присутствии специфического субстрата и кофермента. Активность изоферментов выражали в относительных единицах, высчитанных на основе результатов денситометрирования. Для выявления амилазы в гель вносили крахмал и электрофореграммы окрашивали иодом. Трансаминазы изучали путем колориметрического анализа интенсивности окраски гидра-зона пировиноградной кислоты (в мкм/мг белка). Концентрацию белка определяли по Лоури.
Проявление АДГ, МДГ и ЛДГ на электрофореграммах одно-шести-дневных мух принимали за норму. У самок и самцов не выявлено различий, зависимых от пола, в подвижности и распределении активности фракций отдельных дегидрогеназ. Резкие изменения активности фракций дегидрогеназ отмечены у мух в возрасте 18 дней. У них наблюдается четкое и достоверное перераспределение активностей фракций АДГ и МДГ, а такие увеличение количества фракций ЛДГ. После 30 дней жизни наблюдается резкое уменьшение активности изоферментов всех исследованных дегидрогеназ. Отмечено достоверное уменьшение относительной электрофоретической подвижности изоферментов ЛДГ (на 15%), АДГ (на 20%) и МДГ (в 2 раза) у тридцатидневных мух по сравнению с шестидневными.
В процессе жизни и старения дрозофилы выявлены две активные фракции /_-амилазы, идентифицированные нами как /_-амилаза 1 и /_-амилаза 6. Активность последней у стареющих мух постепенно уменьшаетси. При исследовании трансаминаз получены данные о более высокой активности АлАТ и АсАТ у самцов по сравнению с активностью этих ферментов у самок. Активность АлАТ как у самок, так и у самцов постепенно возрастает с возрастом мух, и у мух в возрасте 24 дней она на 25-50% выше активности АлАТ шестидневных дрозофил. У 30-дневных самок и самцов активность АлАТ снижается до уровня активности молодых мух. Активность АсАТ в процессе жизни и старения самок и самцов дрозофилы не изменяется.
Полученные данные свидетельствуют об изменении в экспрессии генов, кодирующих изученные ферменты, и о существенных различиях в структуре ряда ферментов у молодых и старых мух. Изменения активностей изученных ферментов во времени отражают стадийность процесса старения. Так, в процессе старения дрозофилы можно выделить два этапа: основной (после 30 дней), характеризующийся уменьшением активности к изменением структуры большинства ферментов; и предварительный (от 18 до 30 дней), когда начинаются процессы изменения генетической регуляции, приводящие впоследствии к основному этапу.
См. также:
К гипотезе "о несколько большей приспособленности" лиц с фенотипом 0
Изменения генетического аппарата соматических клеток человека в старческом возрасте
Роль репарации ДНК в долголетии и разработка подходов для увеличения эффективности репарации ДНК
Определение коэффициента наследуемости продолжительности жизни у drosophila melahogaster
Возможные физиологические механизмы регулирования видовой продолжительности жизни
Стимуляция иммуногенеза у молодых и старых мышей с помощью кровопотери
Возрастные изменения в иммунном ответе долгоживущих мышей (CBA*C57BL)F1 гибридов
Возможные механизмы изменения содержания митохондрий на разных стадиях индивидуального развития
Возрастные изменения мембранных белков, митохондриальной АТФ-азы и перекисного окисления липидов в печени крыс
Возрастные особенности липолиза и перекисного окисления липидов в жировой ткани при голодании
...
Обсудить на форуме
