Мингазов Р.С., И.В. Янгиров, С.А. Муслимов, Л.А._Мусина, А.Н. Батанов
(Башкирский государственный медицинский университет, Уфа, Республиканский центр хирургической гепатологии; e-mail: wisk@ufanet.ru)
В настоящее время вопросы патогенеза, диагностики и лечения диффузных заболеваний печени остаются одними из актуальных в медицине как ввиду сложности диагностики и выбора оптимальных методов лечения, так и вследствие тенденции к росту количества больных этими заболеваниями (Нартайлаков М.А. и соавт., 2005).
Появление малоинвазивных методов (внутрипеченочное введение аллогенного биоматериала Аллоплант) (Мингазов Р.С., 1998; Мусина Л.А., 1999; Муслимов С.А., 2000), развитие клеточных технологий (Тимербулатов В.М., Хасанов А.Г., Рахматуллин С.И. и соавт., 2001; Онищенко Н.А., 2004; Пышкин С.А. и соавт., 2004) создали серьезные научные предпосылки в этой области. Поиск новых методов лечения дегенеративных поражений печени натолкнул нас на идею сочетанного применения аллогенного диспергированного биоматериала и трансплантации фетальной ткани печени, так как разные механизмы стимулирующего воздействия на ее регенерацию могут привести к потенцированию эффекта в органе с тяжелыми функциональными нарушениями.
Цель работы: Исследование регенераторных процессов в печени при воздействии фетальных и биологических материалов на экспериментальной модели цирроза печени.
Материалы и методы: нами проведены эксперименты на 150 белых крысах линии Вистар (m=250-300гp.).В начале эксперимента для определения нормальных (исходных) величин изучаемых показателей исследовали 6 здоровых крыс, составивших 1-ю опытную группу. Модель цирроза была получена путем длительного введения внутрижелудочно гепатотропного яда - тетрахлорметана в течение 3 месяцев (2-я опытная группа животных) по схеме (Мингазов Р.С., 1998). Летальность составила 19,4%. Отмечено снижение массы тела у каждой особи в среднем на 45±9,7 гр. Для изучения активности репаративных процессов крыс с циррозом печени разделили на группы: 3-я опытная группа - без каких-либо терапевтических воздействий; 4-я опытная группа - лапаротомия с резекцией части печени; 5-я опытная группа - лапаротомия со стимуляцией регенерации печени аллогенным биоматериалом; 6-я группа - с трансплантацией фетальной ткани; 7-я группа - лапаротомия с сочетанным применением аллогенного биоматериала и трансплантацией фетальной ткани. Стимуляцию регенерации аллогенным биоматериалом проводили по следующей методике: под эфирным наркозом из лапаротомного доступа в каждую долю вводили по 0,1-0,2 мл суспензии биоматериала, который заготавливался из тканей крыс по технологии Аллоплант® в тканевом банке Всероссийского центра глазной и пластической хирургии (дир. - проф. Э.Р. Мулдашев). Для стимуляции репаративных процессов трансплантацией фетальной ткани использовали печень 19-ти дневных эмбрионов крыс. Материал готовили сотрудники Челябинского Биомедицинского центра на основании лицензии ЛАКО Челябинской области № 435.
Трансплантацию проводили предбрюшинно инъекцией 1 мл. суспензии (3-5?105 ядросодержащих клеток).
В процессе эксперимента оценку состояния крыс проводили на основании макроскопических признаков (выпадение волос, гиподинамия, желтушность кожных покровов, изменение массы тела, визуальный осмотр печени при оперативных вмешательствах), изменений биохимических показателей сыворотки крови и данных световой и электронной микроскопии. Животные выводились из опыта на 7, 14, 21, 30, 90, 180 сутки после операции. Препараты для гистологического исследования готовили по стандартной методике. Результаты оценивали по воспалительно-клеточной инфильтрации паренхимы, степени некроза печеночных клеток, фиброза, гипертрофии, гиперплазии ядер, дистрофии гепатоцитов, пролиферации эпителия желчных протоков.
Результаты: По окончании введения животным тетрахлорметана при морфологическом исследовании печени наблюдали типичную картину цирротической трансформации паренхимы с нарушением гистоархитектоники за счет фиброза и узловой перестройки. На основании сравнительного анализа результатов хирургической стимуляции регенерации печени при экспериментальном циррозе выявлено, что при предбрюшинной имплантации фетальной ткани восстановление паренхимы происходит за счет полиплоидии гепатоцитов и их гипертрофии, что обеспечивает раннее восстановление функциональной активности печени после вмешательства (через 7-14 суток). При внутрипеченочном введении диспергированного биоматериала основным лечебным фактором является резорбция избыточной соединительной ткани и последующая пролиферация гепатоцитов, поэтому лечебный эффект достигается на 21-30 сутки после операции. При сочетанном применении диспергированного биоматериала и фетальной ткани обнаружено потенцирование влияния обоих материалов, выражающееся в резорбции избыточной соединительной ткани, пролиферации и полиплоидизации гепатоцитов, восстановлении структуры и массы органа, а также раннее восстановление функциональных показателей печени. Полученные результаты доказывают, что сочетанное применение аллогенного биоматериала и фетальной ткани создает оптимальные условия для формирования структурно-функциональных единиц печени.
См. также:
Инфицированность кордовой крови и возможные пути проникновения патогенных агентов в плод
Клетки кордовой крови и тканевые препараты в схеме лечения ожоговой болезни
Коррекция стрессового недержания мочи у женщин с использованием ткане-инженерной конструкции
Трансплантация аллогенных культивированных клеток в лечении экспериментальных глубоких ожоговых дефектов роговицы у кроликов
Влияние аутотрансплантации различных клеток костного мозга на состояние поврежденного миокарда в разные сроки после инфаркта
Перспективы развития национального законодательства российской федерации в области исследования и применения стволовых клеток
Применение аутологичных мезенхимальных стволовых клеток для лечения больных с хронической сердечной недостаточностью
Роль ионов кальция в регуляции роста эмбриональных стволовых клеток мыши in vitro
Трансплантация мезенхимальных стволовых клеток при некурабельном рассеянном склерозе: реалии и перспектива
Получение пересеваемой клеточной культуры клеток Drosophila melanogaster, трансгенных по гену нейротрофического фактора млекопитающих NGF?
...
Обсудить на форуме
