Gerontology Explorer
База знаний по геронтологии
Форум Рейтинг способов продления жизни Новые материалы Email-рассылка: информация о новых материалах на сайте RSS-канал: информация о новых материалах на сайте Поиск Указатель Экспорт, импорт

     
Влияние аутотрансплантации различных клеток костного мозга на состояние поврежденного миокарда в разные сроки после инфаркта

 

Матюков А.А.1, Власов Т.Д.1, Давыденко В.В.1, Цупкина Н.В.2, Пинаев Г. П.2, Ялфимов А.Н.3

(1 - ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени акад. И.П. Павлова», 2 - НИИ Цитологии РАН, 3 - ФГУ ЦНИ Рентгенорадиологический институт3; e-mail andrems@mail.ru)

 

Лечение сердечно-сосудистых заболевания является важной проблемой во всем мире. Несмотря на развитие фармакологии и хирургии сердечно-сосудистые заболевания остаются главной причиной смерти. Новым перспективным направлением в кардиологии является использование аутологичных клеток костного мозга. Данный метод основан на способности клеток костного мозга участвовать в регенерации поврежденного миокарда. В последние время активно проводятся экспериментальные и клинические работы по использованию клеток костного мозга в лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы. Однако многие вопросы, связанные с типом клеток, способом введения, временем трансплантации остаются нерешенными.

 

Цели исследования:

1. сравнить влияние аутотрансплантации ядросодержащих клеток (ЯСК) и мультипотентных мезенхимных стромальных клеток (ММСК) костного мозга на течение острого инфаркта миокарда

 

2. на модели острого инфаркта миокарда сравнить способы введения клеток костного мозга (интрамиокардиальный и внутривенный)

3. на модели постинфарктного кардиосклероза оценить влияние интрамиокардиальной аутотрансплантации ядросодержащих клеток костного мозга на состояние поврежденного миокарда

 

Материалы и методы: инфаркт миокарда моделировался на кроликах-самцах линии Шиншилла путем лигирования передней нисходящей ветви левой коронарной артерии. На модели острого инфаркта миокарда интрамиокардиально в пораженную зону или в краевую вену уха сразу после коронароокклюзии инъекционным способом вводилась культура ММСК или ЯСК костного мозга. На модели постинфарктного кардиосклероза (через 12 месяцев после коронароокклюзии) в периинфарктную зону инъекционным способом интрамиокардиально вводились ЯСК костного мозга. ЯСК костного мозга получали в результате фракционирования аспирата костного мозга в градиенте плотности Перколла (63%), а культуру ММСК путем культивирования ЯСК в среде a-МЕМ (ISN, США) с 10% сыворотки эмбрионов коров (Hyclone, Новая Зеландия) и гентамицина сульфата (50мкг/мл) в СО2-инкубаторе при 5% концентрации углекислого газа в течение 3 недель.

 

Перед трансплантацией все клетки метили флуорохромом (Hoechst). В контрольных группах вводилось эквивалентное количество ростовой среды. Общее число животных составило 112. Результаты трансплантации оценивали функционально (электрокардиография, однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ), эхокардиография), макроскопически и гистоморфологически. Электрокардиография во всех группах животных выполнялась до операции, через 3 суток, 7 суток, 30 суток после трансплантации клеток и перед выведением животного из эксперимента (12 месяцев после операции). Методом ОФЭКТ проводили оценку перфузии миокарда, используя радиофармпрепарат 99mТс-тетрафосмин (Муоview).

 

В каждой группе исследование проводили до трансплантации и через 10, 45, 90 и 180 суток после трансплантации клеток. Эхокардиографическое исследование выполнялось до операции, через 14суток и 12 месяцев после трансплантации клеток по стандартной методике. Размер зоны инфаркта и индекс дилатации левого желудочка оценивали по срезам сердца кролика, окрашенным 1,3,5-трифенилтетразолием хлоридом, и по гистологическим препаратам миокарда, окрашенным реактивом Маллори.

 

Результаты:

1. на модели острого инфаркта миокарда

- на ЭКГ во всех группах отмечалась закономерная динамика течения острого инфаркта миокарда, в течение первых 7 суток во всех группах регистрировались единичные предсердные и желудочковые экстрасистолы;

 

- в группах животных, которым выполнялась аутотрансплантация ЯСК костного мозга и культуры ММСК, к 3 месяцам после операции отмечалась полная нормализация перфузии миокарда в патологической зоне; в контроле сохранялся дефект перфзии;

 

- через 14 суток после трансплантации ЯСК костного мозга и культуры ММСК отмечалось снижение фракции выброса на 38±5%; через 12 месяцев в группе животных, которым выполняли трансплантацию культуры ММСК, отмечалось увеличение фракции выброса на 29±6%, тогда как в группе животных, которым выполняли трансплантацию ЯСК костного мозга, фракция выброса оставалась сниженной и не отличалась от значений в контрольной группе;

 

- по данным макроскопического и гистоморфологического исследований после трансплантации культуры ММСК отмечалось незначительное увеличение размеров сердца, площадь рубцовой ткани составляла 6,0±1,2%; после трансплантации ЯСК костного мозга - значительное увеличение всех камер сердца, а площадь рубцовой ткани составляла35,8±0,8% (в контрольной группе площадь рубцовой ткани составляла 20,2±1,0%);

 

- после интрамиокардиальной трансплантации ЯСК и ММСК костного мозга меченые клетки определялись в миокарде;

- внутривенное введение ЯСК и ММСК костного мозга не приводит к изменениям функциональных и морфологических показателей по сравнению с контролем, а меченые клетки не определяются в миокарде;

 

2. на модели постинфарктного кардиосклероза

- через 3 месяца после трансплантации ЯСК костного мозга выявлено значительное улучшение перфузии миокарда в патологической зоне (на 35±4%), увеличение фракции выброса (на 20%).

 

- в миокарде идентифицированы меченые клетки

 

Заключение: аутотрансплантация ММСК костного мозга приводит к выраженному положительному влиянию на репарацию поврежденного миокарда; трансплантация ЯСК костного мозга в разные сроки после инфаркта приводит к значительному увеличению перфузии ишемизированного миокарда, однако, трансплантация ЯСК в острейшую фазу инфаркта миокарда не приводит к улучшению систолической функции левого желудочка и сопровождается ухудшением репаративных процессов.

 

Извините, этого рисунка нет.

Рис. 1, 2. Перфузионные томосцинтиграммы миокарда кролика после интрамиокардиальной трансплантации клеток костного мозга сразу и через 12 месяцев после коронароокклюзии.

 

 

См. также:

    Инфицированность кордовой крови и эмбрионов ранних сроков гестации

    Инфицированность кордовой крови и возможные пути проникновения патогенных агентов в плод

    Клетки кордовой крови и тканевые препараты в схеме лечения ожоговой болезни

    Коррекция стрессового недержания мочи у женщин с использованием ткане-инженерной конструкции

    Трансплантация аллогенных культивированных клеток в лечении экспериментальных глубоких ожоговых дефектов роговицы у кроликов

    Применение фетальных и биологических материалов в лечении хронических гепатитов и циррозов печени

    Перспективы развития национального законодательства российской федерации в области исследования и применения стволовых клеток

    Применение аутологичных мезенхимальных стволовых клеток для лечения больных с хронической сердечной недостаточностью

    Роль ионов кальция в регуляции роста эмбриональных стволовых клеток мыши in vitro

    Трансплантация мезенхимальных стволовых клеток при некурабельном рассеянном склерозе: реалии и перспектива

     ...

 

 Обсудить на форуме

 

Изменен: 3.11.09

Узлов всего: 3 914. Узлов на вкладке: 1 617. Узлов в узле: 0. Последнее обновление: 20.01.13 19:07

Gerontology Explorer ©, 2007 - 2013. Все права защищены. Для правообладателей Обратная связь

Хостинг от uCoz